剛果紅（Congo Red,簡(jiǎn)稱(chēng)CR）是一種燃料，他可與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的產(chǎn)物如纖維二糖或葡萄糖發(fā)生這種顯色反應(yīng)，當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分泌的纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就將無(wú)法形成，從而在培養(yǎng)基中形成以纖維素分解菌為中心的透明圈，這樣我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。
常用的剛果紅染色法有兩種
方法一:
先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)
在長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mI。的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物質(zhì)的量濃度為l mol/l的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl溶液，此時(shí)，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周?chē)鷮?huì)出現(xiàn)透明圈。
（加NaCl的原因：剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為寡糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大小不一的透明圈，大的透明圈分解纖維素的能力就強(qiáng)）
方法二:
在倒平板時(shí)就加入剛果紅
配制質(zhì)量濃度為10 mg/mI的CR溶液，滅菌后，按照每200 mI。培養(yǎng)基加入1 mI。的比例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長(zhǎng)出茵落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周?chē)鷮?huì)出現(xiàn)明顯的透明圈
上一篇 : 甲酚紅指示劑的變色范圍
下一篇 : AAF固定液使用說(shuō)明
在線咨詢(xún)